Das Insulinrezeptor-Substrat 1 assoziiert sich mit der SH2-haltigen Phosphotyrosinphosphatase Syp

Das Insulinrezeptor-Substrat 1 (IRS1) ist ein Protein, das schnell auf Tyrosin durch den aktivierten Insulinrezeptor phosphoryliert wird. Syp ist eine neu entdeckte, breit exprimierte Phosphotyrosin (Tyr(P)) Phosphatase, die zwei Src-Homologie-2 (SH2)-Domänen enthält. Wir haben festgestellt, dass die Insulinbehandlung von 3T3-L1-Adipozyten zu einer Komplexbildung zwischen IRS1 und Syp führt. Syp wurde in Immunoadsorbaten von IRS1 aus Extrakten von insulinbehandelten, jedoch nicht von basal behandelten Zellen sowohl durch Immunoblotting als auch durch Tyr(P)-Phosphatase-Aktivität nachgewiesen. Die Assoziation von Syp mit IRS1 erfolgt offensichtlich zwischen den SH2-Domänen von Syp und den Tyr(P)-haltigen Sequenzen von IRS1, da ein Fusionsprotein, das nur die SH2-Domänen von Syp enthält, die Tyr(P)-Form von IRS1 bindet. Im Gegensatz zu den Rezeptoren für epidermales und plättchenabgeleitetes Wachstum, die in ihrem aktivierten Zustand an die SH2-Domänen von Syp binden und die Phosphorylierung von Syp auf Tyrosin in intakten Zellen hervorrufen, bindete die Tyr(P)-Form des Insulinrezeptors nicht an die SH2-Domänen von Syp, und es wurde keine Phosphorylierung von Syp auf Tyrosin in insulinbehandelten 3T3-L1-Adipozyten nachgewiesen. In Kombination mit anderen Ergebnissen deuten diese Resultate darauf hin, dass IRS1 als Docking-Protein für SH2-Domänen haltende Proteine fungiert, die an der Signalgebung vom Insulinrezeptor beteiligt sind.