PUF60: Eine neuartige U2AF65-verwandte Splicing-Aktivität

Wir haben einen neuen Pyrimidin-Trakt-bindenden Faktor, PUF, identifiziert, der zusammen mit U2AF für die effiziente Rekonstitution der RNA-Splicing in vitro erforderlich ist. Die Aktivität wurde gereinigt und besteht aus zwei Proteinen, PUF60 und dem zuvor beschriebenen Splicing-Faktor p54. p54 und PUF60 bilden in vitro einen stabilen Komplex, wenn sie in einem Reaktionsgemisch co-übersetzt werden. Die PUF-Aktivität erleichtert, zusammen mit U2AF, die Assoziation von U2 snRNP mit der prä-mRNA. Diese Reaktion ist abhängig von der Anwesenheit der großen Untereinheit von U2AF, U2AF65, jedoch nicht von der kleinen Untereinheit U2AF35. PUF60 ist homolog zu sowohl U2AF65 als auch dem Hefe-Splicing-Faktor Mud2p. Die C-terminale Domäne von PUF60, die PUMP-Domäne, ist entfernt verwandt mit der RNA-Erkennungs-Motiv-Domäne und ist wahrscheinlich wichtig für Protein-Protein-Interaktionen.