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Die In-situ-Hybridisierung (ISH) ist eine Technik, die es ermöglicht, eine endogene mRNA in histologischen und zytologischen Proben fast bis zur Einzelzelle zu lokalisieren. Aus diesem Grund wird ISH häufig in den Bereichen Genetik, Entwicklungsbiologie und Neurobiologie sowie zu diagnostischen Zwecken in der Medizin eingesetzt. Unser Labor hat Bedingungen für ISH unter Verwendung von 35S-markierten Antisense-RNA-Sonden (Riboprobes) etabliert, die die spezifische Detektion jedes Typs von murinen Retinsäure-Rezeptoren (RAR), Retinoid-X-Rezeptoren (RXR), zellulärem Retinol-bindendem Protein (CRBP) und zellulärem Retinsäure-bindendem Protein (CRABP) Gen-Transkripten ermöglichen. ISH-Studien haben somit gezeigt, dass die meisten Retinoid-Rezeptor-Gene komplexe und unterschiedliche Ausdrucksmuster während der Mäuseentwicklung aufweisen (1–6). Das nachfolgend beschriebene Protokoll wurde durch die Pionierarbeit von Angerer und Kollegen inspiriert (7). Es wurde für histologische Schnitte von Mäusembryonen oder erwachsenen Geweben entworfen, kann jedoch auch auf Proben anderer Arten, einschließlich Menschen, angewendet werden. Dennoch wurden leicht unterschiedliche ISH-Protokolle für die Detektion von RAR-Transkripten in Hühnern (8, 9) und Xenopus-Embryonen (10) beschrieben.
Niederreither et al. (Thu,) haben diese Frage untersucht.