Phosphatidylinositol (PI) 3-Kinase und PI 4-Kinase Bindung an den CD4-p56lck Komplex: die p56lck SH3-Domäne bindet an PI 3-Kinase, jedoch nicht an PI 4-Kinase.

CD4 dient als Rezeptor für Haupt-Histokompatibilitätskomplex Klasse II Antigene und als Rezeptor für das virale Hüllprotein gp120 des humanen Immundefizienzvirus Typ 1 (HIV-1). Es ist an die Protein-Tyrosin-Kinase p56lck gekoppelt, eine Interaktion, die für eine optimale Antwort bestimmter T-Zellen auf Antigene notwendig ist. Neben der Protein-Tyrosin-Kinase-Domäne besitzt p56lck Src-Homologie 2 und 3 (SH2 und SH3) Domänen sowie eine einzigartige N-terminale Region. Der Mechanismus, durch den p56lck intrazelluläre Signale erzeugt, ist unklar, obwohl es das Potenzial hat, mit verschiedenen nachgeschalteten Molekülen zu interagieren. Ein solches nachgeschaltetes Ziel ist die Lipidkinase Phosphatidylinositol 3-Kinase (PI 3-Kinase), die festgestellt wurde, um sich an aktiviertes pp60src und Rezeptor-Tyrosin-Kinasen zu binden. In dieser Studie haben wir überprüft, dass PI 3-Kinase mit dem CD4:p56lck Komplex assoziiert, beurteilt durch die Anwesenheit von PI 3-Phosphat, das aus Anti-CD4-Immunpräzipitaten erzeugt und durch Hochdruckflüssigkeitschromatographisches Analyseverfahren nachgewiesen wurde. Überraschenderweise wurde jedoch auch gefunden, dass CD4-p56lck mit einer anderen Lipidkinase, der Phosphatidylinositol 4-Kinase (PI 4-Kinase), assoziiert war. Das Niveau der assoziierten PI 4-Kinase war im Allgemeinen höher als die Aktivität der PI 3-Kinase. HIV-1 gp120 und Antikörper-vermitteltes Kreuzvernetzen induzierten eine 5- bis 10-fache Erhöhung des Niveaus der mit CD4 assoziierten PI 4- und PI 3-Kinasen. Die Verwendung von Glutathion S-Transferase-Fusionsproteinen, die Lck-SH2-, Lck-SH3- und Lck-SH2/SH3-Domänen trugen, zeigte die Bindung der PI 3-Kinase an die SH3-Domäne von p56lck, eine Interaktion, die durch die Anwesenheit einer benachbarten SH2-Domäne erleichtert wurde. PI 4-Kinase bindete weder an die SH2- noch an die SH3-Domäne von p56lck. CD4-p56lck trägt zur Aktivierungsprozess der T-Zellen PI 3- und PI 4-Kinase bei und könnte eine Rolle bei HIV-1-induzierten Immundefekten spielen.