Ein neuartiges B-Domain O-glycoPEGyliertes FVIII (N8-GP) zeigt volle Wirksamkeit und verlängerte Wirkung in hämostatischen Mausmodellen

Häufige Infusionen von intravenösem Faktor VIII (FVIII) sind erforderlich, um Blutungen im Zusammenhang mit Hämophilie A zu verhindern. Um die Behandlungsbelastung zu reduzieren, wurde rekombinantes FVIII mit einer längeren Halbwertszeit entwickelt, ohne die Proteinstruktur zu verändern. FVIII-Polyethylenglykol (PEG)-Konjugate wurden unter Verwendung eines enzymatischen Verfahrens hergestellt, das PEG (in einem Bereich von 10 bis 80 kDa) selektiv an ein einzigartiges O-verknüpftes Glykan im B-Domain von FVIII koppelt. Die Bindung an den von-Willebrand-Faktor (VWF) wurde für alle Konjugate beibehalten. Nach der Spaltung durch Thrombin wurde die B-Domain und das assoziierte PEG freigesetzt, wodurch aktives FVIII (FVIIIa) mit derselben Primärstruktur und spezifischen Aktivität wie natives FVIIIa erzeugt wurde. Bei FVIII- und VWF-mangelnden Mäusen wurde festgestellt, dass die Halbwertszeit mit der Größe von PEG zunahm. In vivo Potenz und Wirksamkeit von mit 40 kDa PEG (N8-GP) konjugiertem FVIII und unmodifiziertem FVIII waren nicht unterschiedlich. N8-GP hatte eine längere Wirkungsdauer in FVIII-mangelnden Mausmodellen, etwa eine doppelt verlängerte Halbwertszeit in Mäusen, Kaninchen und Zynomolgusaffen; jedoch war die Verlängerung bei Ratten weniger ausgeprägt. Die Bindungskapazität von N8-GP an von menschlichen monocyten-abgeleiteten dendritischen Zellen war im Vergleich zu unmodifiziertem FVIII reduziert, was zu einem mehrere Male reduzierten zellulären Uptake führte. Zusammenfassend hat N8-GP das Potenzial, wirksame Prävention und Behandlung von Blutungen bei Hämophilie A bei reduzierter Dosierungsfrequenz zu bieten.