Interleukin-8-induzierte Priming des oxidativen Ausbruchs von Neutrophilen erfordert die sequenzielle Rekrutierung von NADPH-Oxidase-Komponenten in Lipidraft Bereiche

Die superoxidproduzierende Phagozyten-NADPH-Oxidase besteht aus einem membrangebundenen Flavocytochrom b(558), den zytosolischen Faktoren p47(phox), p67(phox), p40(phox) und der kleinen GTPase Rac2, die bei der Aktivierung von Neutrophilen zur Membran transloziert werden, um den aktiven Komplex zu bilden. Interleukin-8 (IL-8) aktiviert die NADPH-Oxidase nicht, verstärkt jedoch den oxidativen Ausbruch, der durch Stimuli wie formylmethionyl-leucyl-phenylalanin (fMLP) induziert wird, über einen Priming-Mechanismus. Der Einfluss von IL-8 auf die Komponenten der NADPH-Oxidase während des Priming-Prozesses wurde bisher nicht an menschlichen Neutrophilen untersucht. Hier zeigten wir, dass die Behandlung mit IL-8 innerhalb von 3 Minuten die Btk- und ERK1/2-abhängige Phosphorylierung von p47(phox) sowie die Rekrutierung von Flavocytochrom b(558), p47(phox) und Rac2 in cholesterolreiche, detergenresistente Mikroomnipadome (oder Lipidrafts) verstärkte. Im Gegensatz dazu scheiterte eine Behandlung mit IL-8, die 15 Minuten dauerte, daran, Flavocytochrom b(558), p47(phox) oder Rac2 zu rekrutieren, verstärkte jedoch die Btk- und p38 MAPK-abhängige Phosphorylierung und die Translokation von p67(phox) in detergenresistente Mikroomnipadome. Darüber hinaus hemmte Methyl-beta-Cyclodextrin, das Lipidrafts stört, die IL-8-induzierte Priming-Reaktion auf fMLP. Unsere Ergebnisse deuten darauf hin, dass das durch IL-8 induzierte Priming des oxidativen Ausbruchs als Reaktion auf fMLP eine sequenzielle Assemblierung der NADPH-Oxidase-Komponenten in den Lipidrafts von Neutrophilen umfasst.