Mangel an Immunstimulation durch immobilisierte CpG-Oligodeoxynukleotide

Ausgewählte Phosphorothioat-Oligodeoxynukleotide, die CpG (CpG-ODN) enthalten, aktivieren Immunantworten, einschließlich der Proliferation von B-Zellen und der Cytokinproduktion. Der Mechanismus, durch den Zellen CpG-Motive erkennen, ist nicht bekannt. In der Literatur gibt es widersprüchliche Berichte über die Fähigkeit von an feste Träger gebundenen CpG-ODN, Immunität zu stimulieren. Wir haben ein fluoreszierendes, biotinylieres CpG-ODN vorbereitet, ein Reagenz, das das Wachstum von 7TD1-Zellen unterstützt, einer murinen B-Zell-Hybridoma-Linie, die für das Überleben CpG-ODN oder Interleukin-6 (IL-6) benötigt. Die Stimulation des Wachstums von 7TD1-Zellen wurde nicht durch die Komplexierung biotinylierter CpG-ODN mit Streptavidin verringert, aber das Zellwachstum wurde nicht durch an Streptavidin-beschichteten Latex-, magnetischen, Gold- oder Agaroseperlen gekoppelte CpG-ODN unterstützt. Ein fluoreszierendes CpG-ODN wurde auch kovalent über eine 5'-Aminogruppe an mit Cyanogenbromid aktivierte Sepharoseperlen gebunden. Diese derivatisierten Sepharoseperlen unterstützten das Wachstum der 7TD1-Zellen, aber die Inkubation der Perlen mit 7TD1-Zellen führte zum Auftreten von Fluoreszenz innerhalb der Zellen, was darauf hindeutet, dass die Wachstumsstimulation möglicherweise auf CpG-ODN zurückzuführen ist, das aus den Perlen ausgewaschen wurde. Unsere Ergebnisse stimmen mit der Notwendigkeit überein, dass CpG-ODN in Zellen internalisiert wird, um immunstimulierend zu sein.