Zytokin-Genexpression nach in vivo primärer Immunisierung mit Ziegenantikörper gegen Maus-IgD-Antikörper

Zytokine sind wichtige Mediatoren der Effektor-lymphoiden Zellfunktion während einer Immunantwort, aber ihre Expression während einer in vivo Immunantwort ist nicht gut dokumentiert. Wir analysierten die Kinetik der Zytokin-Genexpression im Verlauf einer in vivo primären Immunantwort auf Ziegenantikörper gegen Maus-IgD-Antikörper. Totale RNA wurde aus Milzen isoliert, die von frisch getöteten BALB/c-Mäusen 1 bis 7 Tage nach der Immunisierung entnommen wurden. Die reverse Transkriptase-Polymerase-Kettenreaktion wurde verwendet, um die Expression von sieben Zytokin-Genen zu bewerten, die alle Zytokine kodieren, die von T-Zellen sekretiert werden und wichtig für die Aktivierung und Differenzierung von T- und/oder B-Zellen sind. Diese waren IFN-gamma, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-9 und IL-10. IL-2 und IL-9 zeigten eine frühe erhöhte Expression an den Tagen 2 bis 3 und nahmen ab, als die Expression von IL-4, IL-6, IL-10 und IFN-gamma zunahm. Im Gegensatz dazu zeigte die IL-5-Genexpression nur geringe Veränderungen und wies ein ähnliches Muster wie das Hauskeeping-Gen Hypoxanthin-Guanin-Phosphoribosyltransferase auf. Die Zelltrennung von CD4+ und CD4- Zellen am Tag 3 und Tag 5 nach der Immunisierung ergab, dass CD4+ Zellen die hauptsächliche Quelle der erhöhten Zytokine waren (mit Ausnahme von IL-6). Unsere Ergebnisse zeigen ein spezifisches und hoch reproduzierbares Muster der Zytokin-Genexpression im Verlauf einer primären in vivo Immunantwort, das durch das Fehlen einer klaren Th1/Th2-Dichotomie gekennzeichnet ist.