Veränderungen der Bindungscharakteristika des menschlichen Immunodefizienzvirus-Enhanzerfaktors

Fünf Regionen des menschlichen Immunodefizienzvirus (HIV) langes terminales Wiederholungssequenz (LTR) dienen als Bindungsstellen für zelluläre Proteine, wie durch DNase I-Footprinting gezeigt. Dazu gehören die negative regulatorische, der Enhanzer, SP1, TATA und nicht übersetzte Regionen. Die HIV-Enhanzerregion enthält zwei direkte Wiederholungen einer Sequenz, GGGACTTTCC, die auch in den Enhanzer-Sequenzen des simianen Virus 40, Cytomegalovirus und des Immunglobulin-Kappa-Gens gefunden wird. Um die Bindung an die Enhanzer-Sequenzen im HIV LTR weiter zu charakterisieren, wurde DNase I-Footprinting mit Extrakten durchgeführt, die aus mehreren verschiedenen Zelllinien vorbereitet wurden. Extrakte, die aus lymphoiden Zellen vorbereitet wurden, zeigten im Vergleich zu Extrakten, die aus entweder Monozyten oder HeLa-Zellen stammen, eine veränderte Bindung über der Enhanzerregion. Diese veränderte Bindung in Extrakten, die aus lymphoiden Zellen vorbereitet wurden, führte zu einem Schutz beider direkter Wiederholungen im HIV LTR im Gegensatz zu einem vollständigen Schutz nur einer direkten Wiederholung mit HeLa-Zellen-Extrakten. Als HeLa-Zellen mit Phorbolestern sowohl in Anwesenheit als auch in Abwesenheit des Proteinsynthese-Hemmers Cycloheximid behandelt wurden, wurden die Bindungscharakteristika über dem Enhanzer-Element ähnlich denen in den Extrakten von lymphoiden Zellen. Diese Ergebnisse deuten darauf hin, dass Phorbolester posttranslationale Modifikationen von zellulären Transkriptionsfaktoren induzieren können, die deren DNA-Bindungseigenschaften verändern.