Identifizierung von hoch attenuierten Mutanten des Simian Immunodeficiency Virus

Es wurden Deletionsmutanten des pathogenen Klons des Simian Immunodeficiency Virus Isolat 239 (SIVmac239) abgeleitet, die nef, vpr und upstream Sequenzen (US) in der U3-Region des LTR (SIVmac239 delta3), nef, vpx und US (SIVmac239 delta3x) und nef, vpr, vpx und US (SIVmac239 delta4) fehlen. Diese mehrfach deletierten Derivate replizierten gut in der kontinuierlich wachsenden CEMx174-Zelllinie und waren infektiös für Rhesusaffen. Aufgrund von Viruslastmessungen, der Stärke der Antikörperantworten und des Fehlens eines Krankheitsfortschritts waren diese Mutanten jedoch hoch attenuiert. Die Messungen der zellassoziierten Viruslast stimmten gut mit den Assays zur Plasmaspiegel viraler RNA-Last und mit der Stärke der Antikörperantworten überein; somit spiegelten diese Messungen wahrscheinlich das Ausmaß der viralen Replikation in vivo wider. Ein Derivat von SIVmac239, das vif-Sequenzen fehlte (SIVmac239 delta vif), konnte nur konsistent in einer vif-komplementierenden Zelllinie gezüchtet werden. Dieses delta vif Virus schien auf der Grundlage sensibler Antikörpertests nur sehr schwach infektiös für Rhesusaffen zu sein. Die schwachen Antikörperantworten, die durch SIVmac239 delta vif ausgelöst wurden, waren anscheinend eine Reaktion auf niedrige Spiegel replikierendes Virus, da sie nicht durch hitzeinaktiviertes Virus verursacht wurden und die anti-SIV-Antikörperantworten länger als 1 Jahr anhielten. Diese Ergebnisse und die Ergebnisse früherer Studien ermöglichen eine Rangordnung der relativen Virulenz von neun Mutantenstämmen von SIVmac in folgender Reihenfolge: delta vpr > delta vpx > delta vpr delta vpx etwa delta nef > delta3 > delta3x > oder = delta4 > delta vif > delta5. Die Ergebnisse zeigen auch, dass fast jedes gewünschte Maß an Attenuierung erreicht werden kann, das von immer noch pathogen in einem signifikanten Anteil von Tieren (delta vpr und delta vpx) bis hin zu nicht nachweisbar infektiös (delta5) reicht, einfach durch Variation der Anzahl und Lage der Deletionen in diesen fünf Loci.