Die Freisetzung von freien F2-Isoprostane aus esterifizierten Phospholipiden wird durch intrazelluläre und plasmatische Acetylhydrolasen des Thrombozyten-aktivierenden Faktors katalysiert

F2-Isoprostane werden in vivo durch nicht-enzymatische Peroxidation von in Phospholipiden esterifiziertem Arachidonsäure produziert. Erhöhte Urin- und Plasmaspiegel von F2-Isoprostanen sind mit einer Reihe menschlicher Krankheiten assoziiert. Diese Metaboliten werden als hervorragende Marker für oxidativen Stress in vivo angesehen. Isoprostanes werden zunächst in situ erzeugt, d.h. wenn der Arachidonat-Vorläufer in Phospholipiden esterifiziert ist, und sie werden anschließend in freier Form freigesetzt. Obwohl der/die Mechanismus(se), die für die Freisetzung freier Isoprostanes nach der in situ-Generierung in Membranphospholipiden verantwortlich sind, größtenteils unbekannt sind, wird dieser Prozess wahrscheinlich durch die Aktivität(en) der Phospholipase A2 vermittelt. Hier berichteten wir, dass menschliches Plasma eine enzymatische Aktivität enthält, die diese Reaktion katalysiert. Die Aktivität assoziiert sich mit hochdichtem und niederdichtem Lipoprotein und komigriert mit der Acetylhydrolase des Thrombozyten-aktivierenden Faktors (PAF) in KBr-Dichtegradienten. Plasmaproben von Probanden mit einem Mangel an PAF-Acetylhydrolase setzen keine F2-Isoprostanes aus esterifizierten Vorläufern frei. Die intrazelluläre PAF-Acetylhydrolase II, die Homologie mit dem Plasmazym hat, katalysiert ebenfalls diese Reaktion. Wir fanden heraus, dass sowohl die intrazellulären als auch die plasmatischen PAF-Acetylhydrolasen eine hohe Affinität für esterifizierte F2-Isoprostanes haben. Die Rate der Hydrolyse von esterifizierten F2-Isoprostanen ist jedoch viel langsamer im Vergleich zur Rate der Hydrolyse anderer Substrate, die von diesen Enzymen genutzt werden. Studien mit transgenen Mäusen, die PAF-Acetylhydrolase exprimieren, deuteten darauf hin, dass diese Tiere eine höhere Fähigkeit zur Freisetzung von F2-Isoprostanen im Vergleich zu nicht-transgenen Wurfgeschwistern haben. Unsere Ergebnisse legen nahe, dass PAF-Acetylhydrolasen eine Schlüsselrolle bei der Hydrolyse von in vivo an Phospholipiden esterifizierten F2-Isoprostanen spielen.