Das Kinesin-ähnliche Protein Hset wirkt der Aktivität von Eg5 entgegen und verknüpft Mikrotubuli im mitotischen Spindel von Säugetieren.

Wir haben Antikörper spezifisch für HSET, das menschliche Homolog der KAR3-Familie von minus-Endegerichteten Motoren, vorbereitet. Immuno-EM mit diesen Antikörpern zeigt, dass HSET häufig zwischen Mikrotubuli im metaphasischen Spindel von Säugetieren lokalisiert ist, was mit einer Mikrotubuli-Verknüpfungsfunktion übereinstimmt. Mikroinjektions-Experimente zeigen, dass die Aktivität von HSET für die Organisation des meiotischen Spindels in murinen Oozyten und die taxolinduzierte Asterbildung in kultivierten Zellen unerlässlich ist. Die Hemmung von HSET hatte jedoch keinen Einfluss auf die architektonische oder funktionelle Struktur des mitotischen Spindels in kultivierten Zellen, was darauf hindeutet, dass Zentrosomen die Rolle von HSET während der Mitose maskieren. Wir zeigen auch, dass (zentrosomale) Mikrotubuli-Aster in vitro ohne HSET-Aktivität nicht assemble, jedoch die gleichzeitige Hemmung von HSET und Eg5, einem plus-endgerichteten Motor, das Kräfteverhältnis auf Mikrotubuli wieder ins Gleichgewicht bringt und die Asterorganisation wiederherstellt. In vivo scheitern Zentrosomen daran, sich zu trennen, und monopolare Spindel bilden sich ohne Eg5-Aktivität. Durch die gleichzeitige Hemmung von HSET und Eg5 wird die Zentrosomtrennung wiederhergestellt und in einigen Fällen die bipolare Spindelbildung. Somit nehmen HSET und Eg5 durch Mikrotubuli-Verknüpfung und gegenläufige Motoraktivität an der Spindelbildung teil und fördern die bipolare Spindel, obwohl die Aktivität von HSET für die Spindelbildung und Funktion in kultivierten Zellen aufgrund von Zentrosomen nicht unerlässlich ist.