DNA-Schaden-induzierte Rückbildung und Verarbeitung der Replikationsgabel in Escherichia coli

DNA-Schäden, die die Replikation blockieren, sind eine der Hauptursachen für Umlagerungen, Mutationen und Letalität in allen Zellen. Nach durch ultraviolette (UV)-Strahlung induzierten DNA-Schäden in Escherichia coli erfordert die Wiederherstellung der Replikation RecA und mehrere andere Proteine des recF-Weges. Um den Mechanismus zu charakterisieren, durch den die blockierten Replikationsgabeln sich erholen, verwendeten wir zwei-dimensionale Agarosegelelektrophorese, um zu zeigen, dass durch die DNA-Schäden, die die Replikation blockieren, in vivo eine vorübergehende Rückkehr der Replikationsgabel induziert wird. Das umgekehrte Replikationsgabel-Intermediat wird durch RecA und RecF stabilisiert und von der RecQ-RecJ Helikase-Nuklease abgebaut, wenn diese Proteine abwesend sind. Wir schlagen vor, dass die Rückbildung der Gabel den Reparaturenzymen den Zugang zu dem die Replikation blockierenden Schaden ermöglicht, sodass die prozessive Replikation wieder aufgenommen werden kann, sobald der blockierende Schaden entfernt ist.