Unterdrückung der experimentellen autoimmunen Neuritis durch Leflunomid

Leflunomid ist ein neues immunsuppressives Medikament, dessen aktiver Metabolit A77 1726 den zellulären Nukleotidmetabolismus beeinträchtigt, indem er die Dihydroorotat-Dehydrogenase (DHODH) hemmt, ein geschwindigkeitsbestimmendes Enzym der de novo Pyrimidinsynthese. Darüber hinaus unterdrückt A77 1726 Tyrosinkinasen, die an Signalübertragungswegen beteiligt sind. Wir untersuchten die immunsuppressiven Effekte von Leflunomid in der experimentellen autoimmunen Neuritis (EAN) bei Ratten, die ein Modell für immunvermittelte Neuropathien darstellt. In EAN, die aktiv durch subkutane Injektion von peripherem Nervenmyelin induziert wurde, verhinderte Leflunomid vollständig die Paraparese, wenn es oral ab dem Tag der Immunisierung angewendet wurde. Leflunomid war weitaus effektiver als Azathioprin, das EAN überhaupt nicht milderte. Selbst als Leflunomid therapeutisch nach dem Auftreten der ersten neuropathologischen Zeichen gegeben wurde, stoppte es das Fortschreiten und verringerte erheblich die Schwere und Dauer der EAN. Entzündliche Infiltrate, Demyelinisierung und axonale Degeneration in Querschnitten des Ischiasnervs von Leflunomid-behandelten EAN-Ratten waren stark reduziert. Leflunomid-behandelte Ratten bildeten keine Autoantikörper, wie durch ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) mit einer Mischung aus peripheren Myelinproteinen, einschließlich P2 und Myelin-Basischem Protein, spezifiziert. In der EAN, die durch Injektion von neuritogenen Zellen einer P2-spezifischen T-Helferzelllinie adoptiv übertragen wurde, reduzierte die Anwendung von Leflunomid auch klar die Krankheitszeichen. Zusätzliche Injektion von Uridin neutralisierte nicht den Effekt von Leflunomid. In ähnlicher Weise führte der Transfer von neuritogenen P2-spezifischen T-Zellen, die in Anwesenheit von A77 1726 plus Uridin in vitro aktiviert wurden, weiterhin zu einer verringerten Schwere der in vivo durch Transfer verursachten EAN, obwohl die Proliferation dieser Zellen in vitro identisch mit der von Kontrollzellen war. Die in vitro Aktivierbarkeit des T-Zell-Rezeptor-vermittelten P2-spezifischen T-Zell-Hybridoms wurde durch hohe Konzentrationen von A77 1726 vermindert, wie durch den verringerten Ca(2+)-Flux in das Zytosol belegt. Zusammen mit den Befunden in der adoptiven Transfer-EAN deutet dies darauf hin, dass der antiproliferative Effekt wahrscheinlich nicht der einzige Mechanismus der immunsuppressiven Wirkung von Leflunomid ist. Zusammenfassend unterdrückt Leflunomid effizient EAN und könnte eine vielversprechende Therapie für immunvermittelte Neuropathien darstellen.