Se desarrolló y validó un método robusto y rápido de LC-MS/MS para cuantificar el ácido ascórbico total (vitamina C) en plasma. El ácido ascórbico es vital para la defensa antioxidante y los procesos enzimáticos. La deficiencia y la hipovitaminosis siguen siendo prevalentes en grupos específicos de pacientes y pueden resultar en síntomas clínicos pasados por alto o mal atribuidos. Para preservar el ácido ascórbico después de la venopunción, se mantuvieron muestras de sangre con EDTA en hielo y se procesaron en un plazo de dos horas. El ácido dehidroascórbico se redujo a ácido ascórbico utilizando tris(2-carboxietil)fosfina (TCEP). El ácido ascórbico se separó por cromatografía en fase reversa y se detectó por espectrometría de masas en tándem en modo de ion negativo. La validación del método siguió protocolos estándar. Se realizó un análisis retrospectivo de 547 muestras de pacientes, analizadas con este método, para evaluar la incidencia de deficiencia de vitamina C y hipovitaminosis. Una concentración de TCEP de 15 mM fue suficiente. El ácido ascórbico se eluyó a 1.08 min, con un tiempo total de ejecución de 4.6 min. La imprecisión intra e inter ensayo (tres concentraciones) varió entre 1.8 a 2.2% y 3.2–5.7%, respectivamente. El límite de cuantificación fue de 1.1 μmol/L, adecuado para detectar deficiencia (<11.4 μmol/L). Entre los pacientes analizados, el 10% tenía deficiencia y el 20% tenía hipovitaminosis. Los hombres presentaron niveles de vitamina C aproximadamente 11 μmol/L más bajos que las mujeres, independientemente de la edad. Este método de LC-MS/MS validado permite una evaluación precisa del ácido ascórbico total en entornos clínicos. Con una proporción significativa de pacientes mostrando niveles subóptimos de vitamina C, se necesita aumentar la conciencia para apoyar el cribado dirigido y las intervenciones nutricionales. • Un flujo de trabajo de estabilización de muestras optimizado, reduciendo completamente el ácido dehidroascórbico. • Separación rápida en fase reversa y detección MRM en ion negativo. • Validación rigurosa: permitiendo la detección confiable de deficiencia clínica. • Impacto clínico: el 10% de los pacientes presentaron deficiencia y el 20% tenía hipovitaminosis.
Kelly et al. (Sun,) estudiaron esta cuestión.