Movimiento de una proteína cariofílica a través de los poros nucleares de oocitos.

Recientemente se ha demostrado que las grandes proteínas cariofílicas son transportadas a través de la envoltura nuclear en oocitos de anfibios. En consideración a esto, se realizaron los presentes experimentos para identificar los sitios específicos dentro de la envoltura a través de los cuales ocurre el transporte y determinar si el tamaño molecular es un factor limitante en el proceso de transporte. Se empleó el siguiente procedimiento experimental: partículas de oro coloidal, de tamaños que varían de aproximadamente 20 a 170 A de diámetro, fueron recubiertas con nucleoplasmina, una proteína cariofílica de 165,000-daltons, que se sabe que es transportada a través de la envoltura. Las partículas de oro recubiertas fueron microinyectadas en el citoplasma de los oocitos de Xenopus, y las células fueron fijadas 15 min y 1 h después. Se determinó la localización intracelular del oro con el microscopio electrónico. Se encontró que las partículas recubiertas de nucleoplasmina entran fácilmente en el núcleo. Con base en la distribución de las partículas asociadas con la envoltura, concluimos que el transporte ocurre a través de los poros nucleares. Además, las distribuciones de tamaño de las partículas de oro presentes en el núcleo y el citoplasma no eran significativamente diferentes, lo que indica que la envoltura no discrimina entre partículas con diámetros que van desde 50 a 200 A (las dimensiones incluyen el recubrimiento de nucleoplasmina). El oro coloidal recubierto con nucleoplasmina digerida por tripsina (que carece del dominio polipeptídico necesario para el transporte) o polivinilpirrolidona exógena fueron en gran medida excluidos del núcleo y no mostraron evidencia de transporte.