Résumé Contexte Les déterminations biochimiques des profils d'excrétion urinaire des acides aminés peuvent être nécessaires pour diagnostiquer et prendre en charge les troubles du transport des acides aminés. Un processus simplifié pour analyser les échantillons d'urine prélevés à domicile serait bénéfique pour cette communauté de patients. Nous décrivons la validation d'une stratégie de micro-échantillonnage volumétrique par absorption (VAMS) pour l'analyse de la créatinine et de plusieurs acides aminés (N=22) dans l'urine séchée. Méthodes 30 µL d'urine ont été prélevés de manière volumétrique et séchés sur deux embouts VAMS d'un dispositif Mitra (Neoteryx). Une procédure d'extraction par solvant basée sur l'ultrasonication a été optimisée pour extraire la créatinine et les acides aminés de l'urine séchée. Chacun a été quantifié respectivement dans un laboratoire de génétique biochimique à l'aide de dosages cliniques établis sur un CobasPro (Roche) et une solution d'analyse des acides aminés (AAA) par chromatographie liquide à ultra-haute performance (UPLC) MassTrak (Waters). Les performances de la stratégie VAMS ont été déterminées par une évaluation de l'exactitude, de la précision et de la stabilité. Les effets du transport terrestre (durée, humidité relative (% RH) et température) sur l'urine séchée micro-échantillonnée ont également été examinés. La stratégie VAMS mise au point a été appliquée à l'urine recueillie auprès de patients atteints d'intolérance aux protéines dibasiques avec lysinurie (LPI, OMIM # 222700), de cystinurie (OMIM # 220100) et de phénylcétonurie (PKU, OMIM # 261600). Résultats La créatinine mesurée à partir de l'urine séchée micro-échantillonnée présentait un taux de récupération moyen de 104 ± 15% par rapport à l'urine brute. Des résultats précis de créatinine urinaire ont été obtenus à partir de micro-échantillons séchés de matériel de contrôle de qualité archivé du College of American Pathology (CAP) et d'ERNDiM. Un solvant d'extraction eau:méthanol à 60:40 (v/v) à pH 11 a fourni le taux de récupération moyen d'acides aminés le plus élevé. L'exactitude des résultats d'acides aminés corrigés par la créatinine dérivés des embouts VAMS par rapport à l'urine brute était de 107 ± 13%. La précision inter-jours moyenne (CV%) des acides aminés et de la créatinine était de 12.4% et 7.7%, respectivement. La stabilité moyenne au stockage pendant 10 jours à 5.6°C/89.3%RH, 20.6°C/50.7%RH et 39.8°C/18.7%RH était de 111%, 107% et 110% pour les acides aminés et de 95%, 96% et 98% pour la créatinine, respectivement. Des échantillons d'urine séchée ont été expédiés depuis différents endroits du Massachusetts, de Rhode Island et du New Hampshire vers notre laboratoire pour analyse. La durée maximale de transport, la température et le %RH subis étaient de 6 jours 22 heures 25 minutes, 47°C et 71.1%RH, respectivement. Les acides aminés et la créatinine étaient stables dans l'urine séchée micro-échantillonnée dans toutes les conditions d'expédition, avec des récupérations moyennes de 104 ± 9% et 102 ± 6% par rapport à l'urine brute. Des augmentations marquées et appropriées de l'arginine, de la cystine, de la lysine et de l'ornithine ont été observées respectivement dans l'urine des patients atteints de LPI et de cystinurie et étaient cohérentes avec le diagnostic biochimique. Une élévation marquée de la phénylalanine a également été identifiée dans l'urine séchée d'un patient atteint de PKU. Conclusion Les résultats des acides aminés urinaires corrigés par la créatinine obtenus grâce à la stratégie de test sur urine séchée micro-échantillonnée étaient précis par rapport aux analyses traditionnelles d'échantillons d'urine brute. L'analyse de l'urine séchée à partir d'échantillons recueillis à domicile peut convenir aux patients atteints de troubles du transport des acides aminés.
Ptolemy et al. (Wed,) ont étudié cette question.