Résumé 3999 : Augmentation des effets antitumoraux par des cellules CAR-T sécrétant un anticorps anti-PD-1 à chaîne unique fusionné avec IL-21

Résumé Contexte : La thérapie par cellules T à récepteur antigénique chimérique (CAR-T) a montré des réponses remarquables dans les hémopathies malignes. Cependant, de nombreux patients souffrent d'une réponse limitée et d'une rechute tumorale due à un manque de persistance des cellules CAR-T et à une échappement immunitaire. L'administration de cytokines immunomodulatrices est l'une des stratégies pour améliorer la fonction immunitaire ; cependant, l'effet systémique des cytokines peut être délétère. Méthodes : Pour prévenir les effets toxiques des cytokines, nous avons proposé le concept de cibler les cytokines aux cellules T spécifiques aux tumeurs in vivo. À cette fin, nous avons développé des cellules CAR-T sécrétant une protéine de fusion (PD-1Ab21) composée d'un anticorps anti-PD-1 à chaîne unique et d'IL-21, qui cible l'IL-21 aux cellules CAR-T pour promouvoir leur prolifération et leur différenciation en cellules mémoire tout en bloquant le signal PD-1 des cellules CAR-T. La sécrétion et les fonctions de PD-1Ab21 ont été identifiées. La prolifération et la différenciation des cellules CAR-T sécrétant PD-1Ab21 (PD-1Ab21-CAR-T) ont été comparées in vitro à celles des cellules CAR-T conventionnelles. Les effets thérapeutiques des cellules CAR-T sécrétant PD-1Ab21 ont été étudiés chez des souris immunodéficientes greffées avec le lymphome de Burkitt humain Daudi, la cellule myélome multiple U266 et la cellule mammaire Her2/neu+ BT474. Résultats : Les résultats ont montré que le surnageant de culture des cellules PD-1Ab21-CAR-T, tout comme l'anticorps anti-PD-1, bloquait la liaison de PD-1 à PD-L1 et stimulait la phosphorylation de STAT3 dans la cellule leucémique lymphocytaire T humaine Hut78, avec la même activité que l'IL-21. Dans un milieu de culture conventionnel avec une dose élevée d’IL-2, la prolifération des cellules PD-1Ab21-CAR-T n’était pas différente de celle des cellules CAR-T conventionnelles. Cultivées avec une faible dose d’IL-2 ne pouvant pas soutenir la prolifération des CAR-T conventionnelles, les cellules PD-1Ab21-CAR-T présentaient néanmoins une prolifération significative. Une grande fraction des produits PD-1Ab21-CAR-T co-exprimait CCR7, CD62L et CD45RA, et exprimait un niveau élevé de TCF-1, indiquant un phénotype de type cellule souche mémoire. La plupart des cellules CAR-T conventionnelles présentaient un phénotype effecteur défini comme CD45RA+CCR7-. De plus, le transfert adoptif de cellules PD-1Ab21-CAR-T a montré une expansion significativement améliorée des cellules CAR-T et a permis une éradication tumorale supérieure dans les modèles xénogreffés de malignité des cellules B, de myélome multiple et de cancer du sein Her2/neu+. La fonction cellulaire améliorée par la sécrétion de PD-1Ab21 était médiée par des mécanismes autocrines et/ou paracrines. Conclusion : Nous avons développé des cellules CAR-T améliorées. Nos données fournissent une preuve préclinique soutenant la traduction de cette conception pour une réponse anti-tumorale médiée par les cellules CAR-T améliorée. Format de citation : Ying Li, Jitao Zhao, Xiangrui Cheng, Hang Li, Ran Tian, Qianqian He, Shengdian Wang. Augmentation des effets antitumoraux par des cellules CAR-T sécrétant un anticorps anti-PD-1 à chaîne unique fusionné avec IL-21, résumé. In : Proceedings of the American Association for Cancer Research Annual Meeting 2024; Part 1 (Regular Abstracts); 5-10 avr. 2024; San Diego, CA. Philadelphia (PA) : AACR; Cancer Res 2024 ; 84 (6Suppl) : Résumé nr 3999.