Résumé Contexte : Les récepteurs T (TCR) reconnaissent des épitopes provenant d'antigènes intracellulaires et de surface cellulaire, permettant de cibler diverses classes d'antigènes tumoraux, y compris les antigènes surexprimés, de différenciation et germinaux, ainsi que ceux issus de mutations conductrices, de mutations par décalage du cadre de lecture, de variantes d'épissage et d'éléments rétroviraux endogènes humains (HERV). Les antigènes associés au mélanome (MAGE) sont hautement exprimés dans divers types de tumeurs solides, y compris le mélanome, les cancers pulmonaires non à petites cellules (NSCLC), la vessie et les cancers de la tête et du cou, représentant des cibles prometteuses pour la thérapie TCR-T. Cependant, la découverte de TCR réactifs au MAGE robustes et spécifiques reste un défi en raison du faible débit des méthodologies de dépistage des TCR et de la faible fréquence intrinsèque des cellules T réactives aux tumeurs dans les échantillons tumoraux et le sang périphérique. Méthodes : Nous utilisons une approche de coloration multiplet basée sur la cytométrie de masse, TargetScape®, pour dépister et caractériser les cellules T CD8+ chez des donneurs sains et des échantillons de patients. Nos panneaux de dépistage contiennent plusieurs peptides pour les antigènes de la famille MAGE, y compris A1, C2 et A10. Le séquençage de cellules uniques ou la PCR à cellule unique (scPCR) des cellules T spécifiques aux antigènes tumoraux identifiées avec une grande sensibilité permet une analyse complète du phénotype des T cellules, du transcriptome, de la spécificité des TCR et de la séquence de TCR appariée. Les TCR identifiés par cette méthode sont transduits pour expression dans des lignées cellulaires de rapporteur Jurkat et leur réactivité aux peptides correspondants est évaluée. Les candidats TCR sélectionnés sont ensuite transduits dans des cellules T primaires et évalués pour leur activation et leur fonction effectrice à l'aide de diverses lignées cellulaires cancéreuses exprimant les antigènes endogènes correspondants. L'évaluation de la spécificité est réalisée par des scans à la méthionine et l'identification de peptides cibles potentiels ainsi que le dépistage de réactivité. Résultats : Nous avons utilisé cette approche pour découvrir des TCR naturels ciblant plusieurs antigènes de la famille MAGE. Grâce au dépistage des rapporteurs Jurkat, nous avons observé une activation spécifique de plusieurs TCR en présence de cellules présentatrices d'antigènes et du peptide initialement utilisé pour identifier les TCR. Les cellules T primaires exprimant des candidats TCR prometteurs ont montré des activités de destruction et de libération de cytokines lorsqu'elles ont été confrontées à plusieurs lignées cellulaires de tumeurs solides exprimant des niveaux endogènes de l'antigène MAGE. L'évaluation de la spécificité est actuellement en cours, avec des données préliminaires indiquant des profils de spécificité globalement favorables pour les TCR sélectionnés. Conclusions : Notre plateforme Deep Immunomics nous permet de détecter, caractériser et valider des candidats TCR contre des antigènes cancéreux partagés hautement cliniquement pertinents. En exploitant cette plateforme, nous avons identifié divers TCR spécifiques aux tumeurs naturels présentant des activités contre une gamme de lignées cellulaires de tumeurs solides exprimant des antigènes MAGE. Des candidats prometteurs sont actuellement soumis à des études d'efficacité in vivo. Format de citation : Juliana Velez Lujan, Hannah Fields, Kan Xing Wu, Yovita Purwanti, Emily Xin Zi Tang, Michael Cordeau, Kathleen Mendez, Melissa Wirawan, Michael Fehlings, Katja Fink, Zilei Liu, Daniel MacLeod. Découverte et développement de récepteurs T ciblant les antigènes de la famille MAGE pour la thérapie par cellules T adoptives contre les tumeurs solides résumé. Dans : Actes de la réunion annuelle de l'American Association for Cancer Research 2024 ; Partie 1 (Résumé régulier) ; 2024 Apr 5-10 ; San Diego, CA. Philadelphie (PA) : AACR ; Cancer Res 2024 ; 84 (6Suppl) : Résumé nr 13.
Luján et al. (Fri,) ont étudié cette question.