Études de réplication des lésions d'alkyl phosphotriester dans les cellules humaines

Les lésions d'alkyl phosphotriester (alkyl-PTE) dans l'ADN sont montrées comme étant mal réparées ; cependant, peu de choses sont connues sur la manière dont ces lésions impactent la réplication de l'ADN dans les cellules humaines. Ici, nous avons étudié comment les diastéréoisomères SP et RP de quatre lésions d'alkyl-PTE (alkyl = Me, Et, nPr, ou nBu) au site TT perturbent la réplication de l'ADN dans les cellules HEK293T. Nous avons constaté que ces lésions entravent modérément la réplication de l'ADN et que leur contournement réplicatif est précis. De plus, la déplétion médiée par CRISPR-Cas9 de Pol η ou Pol ζ a entraîné des efficacités de contournement significativement atténuées pour les deux diastéréoisomères des adduits nPr- et nBu-PTE, ainsi que pour le diastéréoisomère SP de l'Et-PTE. Des efficacités de contournement diminuées ont également été détectées pour le diastéréoisomère Rp des lésions nPr- et nBu-PTE lors de l'ablation de Pol κ. Dans l'ensemble, notre étude a révélé l'impact des lésions d'alkyl-PTE sur la réplication de l'ADN dans les cellules humaines et a mis en lumière les rôles des polymérases d'ADN de synthèse translesion individuelle dans le contournement de ces lésions.