Le monoxyde d'azote (NO) et le calcium (Ca2+) sont des médiateurs de la signalisation neuronale étroitement interconnectés, mais leur relation dynamique dans les neurones primaires est restée largement inexplorée. Ici, nous rapportons un dual biosenseur bicistronique qui combine jGCaMP8s pour l'imagerie Ca2+ de haute sensibilité avec le rapporteur fluorescent NO orange O-geNOps, livré par virus adéno-associé (AAV) aux neurones hippocampiques primaires. Nous établissons des conditions d'imagerie optimisées pour la température physiologique et l'oxygène, qui façonnent de manière critique la biodisponibilité du NO. Dans ces conditions, les pics de Ca2+ spontanés et l'activité réseau sont largement insuffisants pour provoquer une production détectable de NO, tandis qu'une élévation robuste de Ca2+ par du K+ extracellulaire élevé (50 mM) ou du glutamate (30 μM) évoque des signaux de NO robustes qui dépassent les réponses aux donneurs de NO exogènes. Inversement, le NO endogène et appliqué exogènement atténue les pics de Ca2+ spontanés, révélant un contrôle de rétroaction de l'excitabilité neuronale dans l'hippocampe. Ensemble, ces résultats démontrent un couplage fonctionnel bidirectionnel entre les signaux de Ca2+ et de NO dans les neurones hippocampiques primaires et introduisent une approche informative pour la visualisation en double couleur des deux messagers dans des conditions proches de la physiologie.
Aydeğer et al. (Mar,) ont étudié cette question.