Ciblage de l'expression génique spatiotemporelle avec les systèmes TARGET et Gene-Switch chez Drosophila

L'expression génique ciblée est devenue une technique standard pour l'étude des questions biologiques chez Drosophila. Jusqu'à récemment, l'expression des transgènes pouvait être ciblée dans la dimension soit du temps, soit de l'espace, mais pas les deux. Plusieurs nouveaux systèmes ont été récemment développés pour diriger simultanément l'expression des transgènes dans le temps et l'espace. Nous décrivons ici deux de ces systèmes que nous avons développés dans notre laboratoire. Le premier système fournit une méthode générale pour le ciblage de l'expression génique temporelle et régionale (TARGET) avec le système conventionnel de séquence activateur en amont GAL4 (UAS) et une molécule GAL80 sensible à la température, qui réprime l'activité transcriptionnelle de GAL4 à des températures permissives. Le second système, appelé Gene-Switch, est basé sur une chimère GAL4-récepteur de progestérone qui est inductible par une hormone. Nous avons utilisé les deux systèmes pour le sauvetage spatial et temporel simultané des dysfonctionnements mnésiques chez le mutant mnésique rutabaga (rut) de Drosophila. Dans ce protocole, nous fournissons des lignes directrices pour l'utilisation de ces deux nouveaux systèmes, qui devraient avoir une utilité générale dans l'étude de la biologie de Drosophila et dans l'utilisation de la mouche comme modèle pour les maladies humaines.