Les agonistes du récepteur-1 de la sphingosine-1-phosphate immunosuppresseurs et anti-angiogéniques induisent l’ubiquitinylation et la dégradation protéasomale du récepteur

La sphingosine-1-phosphate (S1P), un médiateur lipidique multifonctionnel, régule le trafic des lymphocytes, la perméabilité vasculaire et l’angiogenèse par activation du récepteur S1P1. Ce récepteur est activé par FTY720-P, un dérivé phosphorylé de l’immunosuppresseur et composé vasoactif FTY720. Cependant, contrairement au ligand naturel S1P, FTY720-P semble agir comme un antagoniste fonctionnel, bien que les mécanismes impliqués ne soient pas bien compris. Dans cette étude, nous avons examiné le destin du récepteur S1P1 exprimé de manière endogène dans des cellules endothéliales de veine ombilicale humaine activées par l’agoniste et des cellules rénales embryonnaires humaines 293 exprimant la protéine fluorescente verte marquée S1P1. Nous montrons que FTY720-P est plus puissant que S1P pour induire la dégradation du récepteur. Le prétraitement avec un antagoniste de S1P1, VPC 44116, a empêché l'internalisation et la dégradation du récepteur. FTY720-P n'a pas induit la dégradation des mutants du récepteur S1P1 déficients en internalisation. De plus, la régulation à la baisse médiée par l’ARN interférent de la kinase des récepteurs couplés aux protéines G-2 et des bêta-arrestines a aboli la dégradation du récepteur S1P1 induite par FTY720-P. Ces données suggèrent que la phosphorylation induite par l'agoniste de S1P1 et l'endocytose subséquente sont nécessaires à la dégradation du récepteur induite par FTY720-P. La dégradation de S1P1 est bloquée par MG132, un inhibiteur protéasomal. En effet, FTY720-P a fortement induit la polyubiquitinylation du récepteur S1P1, tandis que S1P à des concentrations induisant une internalisation complète n'était pas aussi efficace, suggérant que l'internalisation du récepteur est nécessaire mais pas suffisante pour l'ubiquitinylation et la dégradation. Nous proposons que la capacité de FTY720-P à cibler le récepteur S1P1 vers la voie d'ubiquitinylation et de dégradation protéasomale peut expliquer au moins en partie ses propriétés immunosuppressives et anti-angiogéniques.