La sous-unité catalytique de la télomérase humaine hTERT : organisation du gène et caractérisation du promoteur

La télomérase, l'enzyme qui synthétise l'ADN télomérique, n'est pas exprimée dans la majorité des cellules somatiques humaines mais est activée lors de l'immortalisation in vitro et pendant la tumorigénèse, et réprimée par la différenciation cellulaire. Parmi les deux composants de l'enzyme principale, la protéine catalytique hTERT est limitante pour l'activité. Pour étudier les mécanismes de régulation du gène hTERT, nous avons cloné des séquences génomiques englobant l'unité de transcription complète de hTERT. Le gène hTERT se compose de 16 exons et de 15 introns s'étendant sur environ 35 kb. Des transfections transitoires de cellules humaines immortelles avec des séquences 5' potentielles liées à un reporteur, combinées à une analyse de deletion de ces séquences, ont indiqué que les éléments responsables de l'activité du promoteur se trouvent dans une région s'étendant de 330 pb en amont de l'ATG jusqu'au deuxième exon du gène. Des essais dans différents types cellulaires ont montré que le promoteur hTERT est inactif dans les cellules normales et dans les cellules pré-immortelles transformées, mais, comme la télomérase, il est activé lors de l'immortalisation cellulaire. L'analyse de séquence a révélé que le promoteur hTERT est riche en GC, manque de boîtes TATA et CAAT mais contient des sites de liaison pour plusieurs facteurs de transcription qui peuvent être impliqués dans sa régulation. L'abondance de ces sites suggère la possibilité que l'expression de hTERT puisse être soumise à plusieurs niveaux de contrôle et être régulée par différents facteurs dans différents contextes cellulaires.