Caractérisation des mutants d'insertion Tn917 de Staphylococcus epidermidis affectés dans la formation de biofilm

La formation de biofilm résulte probablement de l'action concertée de l'attachement primaire à une surface spécifique et de l'accumulation en clusters cellulaires multicouches. Ici, nous décrivons l'isolement et la caractérisation de mutants de transposon (Tn917) de Staphylococcus epidermidis O-47 qui étaient négatifs pour le biofilm dans l'essai de plaque microtitration en polystyrène. Parmi 5 000 mutants d'insertion Tn917, 4 mutants négatifs pour le biofilm ont été isolés. Chaque mutant portait une copie de Tn917. Les mutants ont été divisés en deux classes phénotypiques : classe A (mut1 et mut1a) et classe B (mut2 et mut2a). Les mutants de la classe phénotypique A manquaient de quatre protéines de surface cellulaire, étaient moins hydrophobes et étaient affectés dans l'attachement primaire au polystyrène, mais étaient toujours capables de former des clusters cellulaires multicouches. Ils étaient capables de former un biofilm sur une surface en verre, un trait qui était même plus prononcé que dans la souche sauvage O-47. La perte de plusieurs protéines de surface a pu conduire à une réduction des structures hydrophiles de surface, favorisant ainsi l'attachement primaire à une surface en verre et conduisant à la formation subséquente de biofilm. Les mutants de la classe phénotypique B étaient capables de s'attacher au polystyrène mais étaient incapables de former des clusters cellulaires multicouches, avaient des protéines de surface cellulaire et une hydrophobicité inchangées, et étaient incapables de former un biofilm sur une surface en verre, mut1 et mut2 pouvaient être complétés par des fragments d'ADN de type sauvage contenant les sites d'insertion Tn917 de mut1 et mut2, respectivement. Le clone complémenté positif pour le biofilm mut1 (pRC20) produisait une protéine de 60 kDa qui est postulée pour fonctionner comme l'adhésine pour se lier au plastique. Les caractéristiques de liaison au polystyrène et la capacité de former des clusters cellulaires multicouches sont distinctes sur le plan phénotypique et génétique.