La récupération des protéines de tri vacuolaire Vps10p des endosomes vers le Golgi nécessite la fonction des produits géniques VPS29, VPS30 et VPS35

Les mutations dans les gènes VPS29 et VPS30 de S. cerevisiae entraînent un défaut sélectif de tri des protéines dans lequel la carboxypeptidase Y (CPY) vacuolaire est mal triée et sécrétée par la cellule, tandis que d'autres hydrolases vacuolaires solubles comme la protéinase A (PrA) sont livrées à la vacuole. Ce phénotype est similaire à celui observé dans les cellules présentant des mutations dans les gènes VPS10 et VPS35 précédemment caractérisés. Vps10p est une protéine transmembranaire du Golgi tardif qui agit comme le récepteur de tri pour les hydrolases vacuolaires solubles comme CPY et PrA, tandis que Vps35p est une protéine de membrane périphérique qui co-fractionne avec des membranes enrichies en Vps10p. Les séquences des gènes VPS29, VPS30 et VPS35 ne donnent pas encore d'indices sur les fonctions de leurs produits. Chacun est prédit pour coder une protéine hydrophile avec des homologues dans les génomes humain et C. elegans. Fait intéressant, les mutations dans les gènes VPS29, VPS30 ou VPS35 modifient la distribution subcellulaire de la protéine Vps10, entraînant un déplacement de Vps10p de Golgi vers la membrane vacuolaire. La voie que prend Vps10p pour atteindre la vacuole dans un mutant vps35 ne dépend pas de l'arrivée médiée par Sec1p à la membrane plasmique mais nécessite l'activité du t-SNARE endosomal pré-vacuolaire, Pep12p. Un allèle conditionnel à température du gène VPS35 a été généré et a été trouvé pour causer un mauvais tri/sécrétion de CPY et aussi pour que Vps10p se localise de manière erronée dans une fraction de membrane vacuolaire à la température non permissive. Vps35p continue de co-fractionner avec Vps10p dans les mutants vps29, suggérant que Vps10p et Vps35p peuvent interagir directement. Dans l'ensemble, les données indiquent que les produits géniques VPS29, VPS30 et VPS35 sont nécessaires pour le recyclage normal de Vps10p de l'endosome pré-vacuolaire vers le Golgi où il peut initier des cycles supplémentaires de tri d'hydrolases vacuolaires.