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L'ester de lauryle de pyrene-méthyle fluorescent (PMLes) a été synthétisé et utilisé pour la détermination des activités lipasiques cellulaires dans des lymphoblastes et des fibroblastes de sujets normaux et de patients atteints des maladies de stockage de Wolman ou des esters cholestériques (toutes deux présentant une déficience de la lipase acide lysosomale). L'hydrolyse de PMLes par la lipase acide pouvait être suivie directement dans un spectrofluorimètre ; cela était possible en raison de l'émission de fluorescence très élevée du pyrene-méthanol à 378 nm (forme monomérique) en milieu aqueux, tandis que le substrat n'a pratiquement aucune émission monomérique à 378 nm mais n'émet qu'à 475 nm (forme excimérique) dans les conditions expérimentales utilisées : cette propriété nous a permis d'utiliser PMLes comme un substrat fluorogénique. Dans une procédure alternative, la réaction enzymatique pouvait être déterminée après partition du mélange réactionnel dans un système biphasique d'heptane et d'éthanol aqueux ; le substrat résiduel non dégradé partitionnait dans la phase supérieure d'heptane et la fluorescence du produit (c'est-à-dire le pyrene-méthanol) était lue dans la phase aqueuse-éthanolique inférieure, à 378 nm. PMLes a été hydrolysé dans des extraits de lymphoblastes et de fibroblastes normaux par au moins deux lipases, une lipase acide (pH 4.0) et une seconde enzyme plus neutre (pH 6.5). L'activité de la lipase acide était pratiquement absente dans les lymphoblastes et les fibroblastes provenant de maladies de stockage de Wolman ou d'esters cholestériques. Cela démontre que le PMLes fluorescent est hydrolysé par la lipase acide lysosomale et peut être utilisé comme un substrat fluorogénique très sensible qui permet un enregistrement direct de la formation du produit et est approprié pour le diagnostic enzymatique de l'une ou l'autre de ces maladies.
Nègre et al. (Sun,) ont étudié cette question.