Les protéines non structurales 2 et 3 interagissent pour modifier les membranes des cellules hôtes lors de la formation du complexe de réplication de l'arterivirus

Les polyprotéines réplicases du virus de l'artérite équine (EAV ; famille Arteriviridae, ordre Nidovirales) sont traitées par trois protéases virales pour produire 12 protéines non structurales (nsps). Les produits de clivage de nsp2 et nsp3 ont été trouvés précédemment comme interagissant, une propriété qui permet à nsp2 d'agir comme co-facteur dans le traitement de la partie en aval de la polyprotéine par la protéase nsp4. Fait remarquable, lors de l'infection des cellules Vero, mais pas des cellules BHK-21 ou RK-13, nsp2 d'EAV est maintenant montré comme étant sujet à un clivage additionnel, interne. Dans les cellules Vero, environ 50 % de nsp2 (61 kDa) a été clivé en une partie N-terminale de 18 kDa et une partie C-terminale de 44 kDa, très probablement par une protéase de la cellule hôte qui est absente dans les cellules BHK-21 et RK-13. Bien que les conséquences fonctionnelles de cette étape de traitement supplémentaire soient inconnues, les expériences dans les cellules Vero ont révélé que la partie C-terminale de nsp2 interagit avec nsp3. La plupart des nsps d'EAV se localisent dans des structures à double membrane induites par le virus dans la région périnucléaire de la cellule infectée, où a lieu la synthèse RNA virale. Il est maintenant démontré que, dans un système d'expression, la co-expression de nsp2 et nsp3 est à la fois nécessaire et suffisante pour induire la formation de structures à double membrane qui ressemblent de manière frappante à celles trouvées dans les cellules infectées. Ainsi, les produits de clivage de nsp2 et nsp3 jouent un rôle crucial dans deux processus communs aux virus à ARN à brin positif qui se répliquent dans les cellules mammifères : la protéolyse contrôlée des précurseurs de la réplicase et l'association membranaire du complexe de réplication virale.