Amélioration de la réactivité à l'insuline par inactivation des phosphatases protéine-tyrosine médiée par le monoxyde d'azote

La synthèse de NO est un préalable à une sensibilité adéquate à l'insuline dans les tissus cibles de l'insuline ; cependant, la base moléculaire de ce processus reste peu claire. En utilisant un modèle d'activation de la synthase de l'oxyde nitrique endothélial (eNOS) transfectée dans des cellules COS-7, nous avons montré un rôle critique du NO dans la réactivité à l'insuline, comme en témoigne une augmentation dépendante du NO des niveaux de phosphorylation tyrosine du récepteur de l'insuline et de ses effecteurs en aval, le substrat du récepteur de l'insuline-1 et PKB/AKT. Nous avons émis l'hypothèse que l'inactivation induite par le NO des phosphatases protéine-tyrosine endogènes (PTPs) renforcerait la signalisation médiée par le récepteur de l'insuline. Pour tester cette hypothèse, nous avons conçu une nouvelle méthode d'étiquetage des PTP utilisant une sonde réagissant avec le sulfhydryl de cystéine. Dans les conditions acides utilisées dans cette étude, la sonde a reconnu les formes réduites et actives mais pas les formes S-nitrosylées et inactives des PTP endogènes. Nos données suggèrent que les phosphatases SHP-1, SHP-2 et PTP1B, mais pas TC-PTP, sont susceptibles d'être S-nitrosylées au résidu de cystéine du site actif concomitamment avec un pic de production de NO en réponse à la stimulation par l'insuline. Ces résultats ont été confirmés par des tests d'activité phosphatase. Nous avons examiné plus avant le rôle du NO en tant que régulateur de la signalisation de l'insuline par l'interférence par ARN qui abolit l'expression endogène de eNOS dans des cellules endothéliales MS-1. Nous avons montré que la production de NO dépendante de eNOS est essentielle pour l'activation de la signalisation de l'insuline. Nos résultats démontrent que le NO médiat l'amélioration de la réactivité à l'insuline via l'inhibition des phosphatases du récepteur de l'insuline.