Rôle de MSK1 dans la voie de signalisation menant à la synthèse de PAF médiée par VEGF dans les cellules endothéliales

Les effets inflammatoires du facteur de croissance endothélial vasculaire (VEGF) nécessitent une synthèse aiguë de facteur activateur des plaquettes (PAF) par les cellules endothéliales (EC). Nous avons précédemment rapporté que la synthèse de PAF médiée par VEGF implique l'activation du complexe récepteur VEGF-2/Néropiline-1, ce qui conduit à l'activation des kinases mitogènes activées par les protéines (MAPK) p38 et p42/44 et de la phospholipase A(2) sécrétoire de groupe V (sPLA(2)-V). Les mécanismes régulant sPLA(2)-V restant inconnus, nous avons étudié le rôle de la kinase-1 activée par mitogènes et stress (MSK1), qui peut être activée de manière rapide et transitoire par p38 ou p42/44 MAPKs. Dans des cellules endothéliales aortiques bovines natives (BAEC), nous avons observé une interaction protéique constitutive de MSK1 avec p38, p42/44 MAPKs, et sPLA(2)-V. Ces interactions protéiques étaient maintenues dans les BAEC transfectées soit avec le vecteur vide pCDNA3.1, MSK1 de type sauvage (MSK1-WT) ou le mutant kinase morte N-terminale MSK1 (MSK1-D195A). Cependant, dans les BAEC exprimant le mutant kinase morte C-terminale MSK1 (MSK1-D565A), l'interaction entre MSK1 et sPLA(2)-V était réduite de 82 % et 90 % dans des conditions basal et traitées par VEGF par rapport aux BAEC natives. Le traitement avec VEGF pendant 15 minutes a augmenté la synthèse basale de PAF dans les BAEC natives, pCDNA3.1, MSK1-WT et MSK1-D195A de 166 %, 139 %, 125 % et 82 %, respectivement. En revanche, la synthèse de PAF a été empêchée dans les cellules exprimant le mutant MSK1-D565A. Ces résultats démontrent le rôle essentiel du domaine C-terminal de MSK1 pour son interaction constitutive avec sPLA(2)-V, qui semble essentielle pour soutenir la synthèse de PAF médiée par VEGF.