Régulation de la phosphorylation des tyrosines p130Cas médiée par les intégrines dans les cellules B humaines

L'engagement des intégrines beta1 dans des lignées cellulaires humaines B terminalement différenciées, telles que ARH-77, conduit à une phosphorylation des tyrosines du substrat p130 associé à Crk (Cas). Cas régule l'assemblage de plusieurs protéines contenant des domaines SH2 et SH3 en complexes de signalisation, qui sont potentiellement impliqués dans la propagation des signaux en aval. Nous démontrons ici que le Cas immunoprécipité à partir de cellules ARH-77 stimulées par les intégrines beta1 était associé à des activités de kinase et de phosphatase des tyrosines et que la ligation des intégrines entraînait le recrutement d'au moins la kinase des tyrosines p59(Fyn) et de la phosphatase des tyrosines SHP2 dans des complexes immunes de Cas. Des études de cotransfection dans des cellules COS-7 ont de plus indiqué que l'interaction physique Fyn/Cas et la phosphorylation de Cas médiée par Fyn nécessitaient les acides aminés 638-889 dans la région C-terminale de Cas. Cette séquence contient à la fois des motifs de liaison pour les domaines SH2 et SH3 de c-Src. Des études de liaison in vitro utilisant des protéines de fusion dérivées des domaines SH2 ou SH3 de Fyn ont suggéré que les deux domaines de Fyn peuvent participer à l'interaction Fyn/Cas. Ces données impliquent Fyn et SHP2 comme des modulateurs potentiels des complexes de signalisation de Cas dans les cellules B.