Augmentation de la charge tout en préservant les complexes protéiques non covalents pour ESI-MS

Une augmentation de la charge multiple des protéines natives et des complexes protéiques non covalents est observée dans les spectres de masse obtenus par ionisation par électrospray (ESI) à partir de solutions protéiques non dénaturantes contenant jusqu'à 1 % (vol/vol) d'alcool m-nitrobenzyl (m-NBA). Les augmentations de charge variaient de 8 % pour le complexe du protéasome 20S alpha(7)beta(7)beta(7)alpha(7) de 690 kDa à 48 % de charge supplémentaire pour la protéine carbonique anhydrase-II de 29 kDa liée au zinc. Aucune dissociation des ligands/sous-unités non covalemment liés n'a été observée après l'ajout de m-NBA. Il n'est pas clair si l'augmentation de la charge est liée à la tension de surface modifiée comme proposé dans le modèle de "supercharge" d'Iavarone et Williams (Iavarone, A. T.; Williams, E. R. J. Am. Chem. Soc.2003, 125, 2319-2327). Cependant, des complexes protéiques non covalents plus fortement chargés sont utiles pour relâcher légèrement les exigences de rapport masse/charge (m/z) du spectromètre de masse pour la détection et seront efficaces pour améliorer l'efficacité des études de spectrométrie de masse en tandem de complexes protéiques.