Établissement d'un modèle de knockout inductible pour le gène lié au chromosome Z de la poule DMRT1

doxycycline (DOX), atteignant une efficacité de knockout de 80%. Suite à l'administration de plasmides encapsulés dans de la polyéthylène imine (PEI) dans des embryons de poulet, nous avons réussi à implémenter le système inductible in vivo. L'analyse quantitative a confirmé un knockout mosaïque de DMRT1 avec une efficacité observée atteignant 45%. Après la disruption ciblée, nous avons évalué les altérations de l'expression des gènes et des protéines liées au sexe via qRT-PCR et Western blot (WB). De plus, un ELISA a été réalisé pour mesurer les niveaux de testostérone dans les gonades embryonnaires mâles à travers plusieurs stades de développement (E4.5 à E18.5). L'analyse qRT-PCR a montré qu'après induction, les gènes liés aux femelles (CYP19A1, FOXL2, ESR1) étaient significativement up-régulés, et les gènes liés aux mâles (DMRT1, SOX9, AMH) étaient significativement down-régulés. Les résultats de WB ont révélé une augmentation des niveaux d'expression protéique de CYP19A1 et FOXL2, et une diminution de l'expression protéique de SOX9 après induction. L'ELISA a confirmé que les niveaux de testostérone dans les gonades des embryons mâles induits étaient significativement réduits par rapport aux mâles normaux et non induits. L'étude a réussi à établir un système de knockout DMRT1 inductible chez les poules. Ce système régule efficacement l'expression des gènes liés au sexe et réduit les niveaux de testostérone dans les embryons mâles, fournissant un soutien théorique et technique pour l'élevage de nouveaux matériaux de reproduction contrôlés par le sexe.