Isolement et culture de l'endothélium microvasculaire à partir de tissu adipeux humain.

L'étude des cellules endothéliales humaines en culture tissulaire a précédemment été limitée à la veine ombilicale, une source de gros vaisseaux, et à l'endothélium microvasculaire provenant du prépuce humain, de la rate et des glandes surrénales. L'endothélium microvasculaire cultivé à partir de ces sources nécessitait des flacons de culture revêtus de matrice, un milieu conditionné par des tumeurs ou 50 % de sérum humain pour la croissance et la sous-culture. Pour obtenir des cultures d'endothélium microvasculaire avec des exigences de croissance moins strictes, le tissu adipeux humain a été digéré avec de la collagénase et les cellules endothéliales ont été séparées des autres éléments stromaux par filtration séquentielle et superposition de cellules sur de l'albumine à 5 %. En utilisant un milieu standard contenant 10 % de sérum fœtal bovin, ces cellules ont facilement atteint la confluence et ont survécu aux passages en série. Lorsque les cultures étaient sous-confluentes, des extensions cytoplasmiques et une morphologie de type capillaire ont été observées. Les cultures confluentes présentaient l'apparence de "pavés" caractéristique d'autres préparations endothéliales. La microscopie électronique a démontré la présence de jonctions serrées caractéristiques et de vésicules pinocytotiques. La coloration immunofluorescente pour le facteur VIII était positive, et les cultures contenaient l'activité de l'enzyme de conversion de l'angiotensine. Ainsi, des cultures d'endothélium microvasculaire humain ont été facilement obtenues à partir de tissu adipeux et n'exigeaient qu'un milieu standard avec 10 % de sérum pour la croissance et la sous-culture. Ce système peut être utilisé pour étudier la biologie des cellules endothéliales humaines et peut se révéler utile dans l'étude d'états pathologiques tels que la microvasculopathie diabétique et l'angiogenèse tumorale.