Exposition du plasminogène et d'un nouveau récepteur du plasminogène, Plg-RKT, sur des plaquettes humaines et murines activées

Les taux d'activation du plasminogène sont augmentés par la liaison à la surface cellulaire. Nous avons précédemment démontré que le plasminogène exogène se lie à des plaquettes exposant de la phosphatidylsérine et étendues. Les plaquettes contiennent du plasminogène dans leurs α-granules, mais la sécrétion de plasminogène par les plaquettes n'a pas été étudiée. Récemment, un nouveau récepteur du plasminogène dépendant de la lysine, Plg-RKT, a été décrit sur les macrophages. Ici, nous avons analysé le pool de plasminogène dans les plaquettes et examiné si les plaquettes expriment Plg-RKT. La teneur en plasminogène du supernatant de plaquettes au repos et stimulées par le collagène/thrombine était similaire. Le prétraitement avec l'analogue de la lysine, l'acide ε-aminocaproïque, a significativement augmenté le plasminogène dérivé des plaquettes (0,33 contre 0,08 nmol/108 plaquettes) dans le supernatant stimulé, indiquant un mécanisme de rétention membranaire dépendant de la lysine. La rétention de plasminogène dérivé des plaquettes dépendante de la lysine sur les plaquettes humaines activées par la thrombine et la convulxine a été confirmée par cytométrie de flux. Les plaquettes ont initié une activité fibrinolytique dans des caillots déficients en plasminogène marqués fluorescent et dans des tests de lyse de caillots turbidimétriques. Une bande de 17 kDa, cohérente avec Plg-RKT, a été détectée dans la fraction membranaire des plaquettes par western blotting. La microscopie confocale des plaquettes stimulées a révélé que Plg-RKT se co-localisait avec le plasminogène dérivé des plaquettes sur la membrane des plaquettes activées. L'exposition au plasminogène était significativement atténuée dans les plaquettes stimulées par la thrombine et la convulxine provenant de souris Plg-RKT-/- par rapport aux homologues Plg-RKT+/+. L'exposition membranaire de Plg-RKT n'était pas dépendante du plasminogène, car des niveaux similaires du récepteur ont été détectés dans des plaquettes plasminogène-/-. Ces données soulignent Plg-RKT comme un nouveau récepteur du plasminogène dans les plaquettes humaines et murines. Nous montrons pour la première fois que le plasminogène dérivé des plaquettes est retenu sur la membrane des plaquettes activées et dirige la fibrinolyse locale en améliorant l'activation du plasminogène médiée par la surface cellulaire.