Spécification T-lignée retardée, asynchrone et réversible induite par le signalement Notch/Delta

En utilisant le système OP9-DL1 pour délivrer un signalement Notch/Delta contrôlé temporellement, nous montrons que les progéniteurs hématolymphoïdes pluripotents subissent une spécification T-lignée et une inhibition B-lignée en réponse au signalement Notch de manière retardée et asynchrone. Les progéniteurs hautement enrichis provenant du foie fœtal nécessitent > ou = 3 jours pour commencer la différenciation en B- ou T-lignée. L'analyse en culture switch clonale montre que la descendance de certaines cellules uniques peut encore générer à la fois des cellules B- et T-lignée, après 1 semaine de livraison continue ou de privation du signalement Notch/Delta. Le signalement Notch induit des gènes T-cellules et réprime des gènes B-cellules, mais la cinétique d'activation des facteurs de transcription spécifiques à la lignée est significativement retardée après l'induction des gènes cibles de Notch et peut être découplée temporellement de la réponse Notch. Dans les cellules qui initient la différenciation des T-cellules et l'expression des gènes le plus lentement en réponse au signalement Notch/Delta, les gènes cibles de Notch sont induits au même niveau que dans les cellules qui répondent le plus rapidement. L'expression des gènes spécifiques à la lignée précoce est également rapidement réversible dans les cultures switch. Ainsi, bien que nécessaire pour induire et maintenir le développement des T-cellules, le signalement Notch/Delta n'est pas suffisant pour la spécification et l'engagement T-lignée, mais peut plutôt être permissif pour le maintien et la prolifération de progéniteurs non engagés, qui sont omis dans les modèles de choix binaire.