Expression et fonction de B7 sur les cellules de Langerhans épidermiques humaines

La molécule B7 est exprimée par les APC qui peuvent costimuler les cellules T en se liant aux récepteurs de surface des cellules T CD28 et CTLA-4. La cellule de Langerhans (LC) épidermique humaine est l'un des APC les plus puissants, pourtant l'expression de B7 par ce type de cellule n'a pas été précédemment évaluée. Nous avons utilisé une protéine de fusion CTLA4-Ig qui se lie à B7 avec une haute avidité pour sonder l'expression à la surface des cellules de B7 par des LC cultivées et non cultivées. Les LC cultivées pendant 1 jour ou plus ont été spécifiquement colorées avec du CTLA4-Ig biotinylé et de la streptavidine fluorescente. En revanche, la liaison de CTLA4-Ig aux LC fraîchement isolées n'a pas été détectée. Les distributions de surface cellulaire de B7 et de HLA-DR sur des LC cultivées différaient, car la liaison de CTLA4-Ig était localisée à des foyers discrets, tandis que l'anticorps monoclonal anti-DR colorait uniformément la membrane plasmique des LC. Des analyses de l'ARNm des cellules épidermiques (EC) ont indiqué que le gène B7 est exprimé par ces cellules. Ainsi, des sondes géniques B7 se sont spécifiquement hybridées à l'ARNm B7 amplifié par PCR isolé des EC cultivées et non cultivées. Étant donné que les LC sont le seul type cellulaire épidermique normal qui induit la prolifération des cellules T allogéniques, le rôle de B7 dans cette fonction LC a été étudié en co-cultivant des cellules T CD4+ au repos hautement purifiées et des EC allogéniques en présence de CTLA4-Ig, d'anti-CD54 (RR/1, anticorps monoclonal anti-molécule d'adhésion intercellulaire-1) ou des deux. CTLA4-Ig et RR/1 ont chacun inhibé les réponses des cellules T CD4+ aux EC allogéniques fraîchement isolées, et une inhibition coopérative de plus de 90 % a été observée dans les cultures traitées avec à la fois CTLA4-Ig et RR/1 à 5 microgrammes/ml. CTLA4-Ig a inhibé la stimulation par soit des EC frais soit des EC cultivés, suggérant que la puissance accrue des LC cultivées par rapport aux LC non cultivées peut refléter le temps nécessaire pour que les LC non cultivées expriment B7 en surface cellulaire in vitro. Ces études indiquent que B7 est exprimé à la surface cellulaire des LC cultivées, et que B7 des LC costimule la prolifération des cellules T CD4+ allogéniques au repos.