Régulation du calcium du complexe glycoprotéique IIb-IIIa des plaquettes.

Les glycoprotéines de membrane plaquettaire (GP) IIb et IIIa forment un complexe hétérodimère dépendant du Ca2+ (GP IIb-IIIa) en solution détergente. Pour déterminer si ces glycoprotéines étaient complexes ou dissociées dans des plaquettes humaines intactes, des plaquettes entières marquées au 125I ont été lysées avec un tampon EDTA/Triton X-100, qui stabilisait à la fois les formes complexes et dissociées de GP IIb et GP IIIa. Le pourcentage de complexe hétérodimère présent après lyse a été déterminé en quantifiant la sédimentation de GP IIIa dans des gradients de saccharose. La distribution de GP IIIa dans les fractions de gradient de saccharose provenant de plaquettes non marquées a été détectée par incubation de concanavaline A au 125I avec des Western blots. Il a été déterminé que GP IIb et GP IIIa existaient principalement sous forme du complexe GP IIb-IIIa dans les plaquettes non stimulées (92 % complexes) ou stimulées par la thrombine (90 % complexes). Le complexe GP IIb-IIIa dans les plaquettes non stimulées pouvait être dissocié de manière réversible par de brèves incubations (jusqu’à 10 minutes) à 37 degrés C avec EDTA, tandis que des incubations plus longues (30 minutes) avec EDTA entraînaient une polymérisation irréversible de GP IIb et GP IIIa. La dissociation du complexe GP IIb-IIIa par EDTA dans des cellules intactes était dépendante de la température, et la concentration critique de Ca2+ extracellulaire pour la dissociation était de 10(-5) à 10(-6) M. Ces résultats montrent que GP IIb et GP IIIa existent sous forme d’un complexe hétérodimère dépendant du Ca2+ dans des plaquettes intactes et que le traitement des plaquettes avec EDTA peut avoir des effets multiples sur ce complexe.