La réponse de mélanisation des moustiques nécessite une activation hiérarchique des homologues des protéases sériques à domaine clip non catalytiques

Les cascades de protéases sériques régulent d'importantes réponses immunitaires chez les insectes, notamment la mélanisation et l'activation de la voie Toll. Un composant important de ces cascades est constitué par les homologues des protéases sériques à domaine clip (cSPHs), qui sont non catalytiques, mais essentiels pour activer l'enzyme prophénoloxydase (PPO) dans la réponse de mélanisation lors d'infections septiques. L'activation des cSPHs nécessite leur clivage protéolytique, mais les facteurs qui contrôlent leur activation et la complexité de leurs interactions au sein de ces cascades demeurent flous. Ici, nous rapportons l'identification de CLIPA28 comme un nouvel cSPH lié à l'immunité dans le vecteur du paludisme Anopheles gambiae. L'analyse fonctionnelle génétique utilisant l'interférence ARN (ARNi) a révélé que CLIPA28 est essentiel pour la mélanisation des parasites Plasmodium berghei chez les moustiques réfractaires et pour la résistance des moustiques aux infections fongiques. Nous montrons de plus, en utilisant des approches biochimiques et génétiques combinées, que CLIPA28 fait partie d'un réseau d'au moins quatre cSPHs, dont les membres sont activés de manière hiérarchique à la suite d'infections septiques. L'épuisement de la protéine semblable au complément TEP1 a annulé l'activation de ce réseau après infections septiques, tandis que l'épuisement de l'inhibiteur de protéase sérique 2 (SRPN2) a déclenché une activation renforcée du réseau, même chez les moustiques naïfs, aboutissant à une réduction dramatique des niveaux d'hémolymphe des cSPHs, qui a parallèlement évolué à celle de PPO. Nos données suggèrent que les cSPHs sont engagés dans des interactions complexes et multilaminaires au sein des cascades de protéases sériques qui régulent la mélanisation, et identifient TEP1 et SRPN2 comme deux régulateurs maîtres du réseau cSPH.