Une nouvelle méthode basée sur le décalage spectral pour caractériser les interactions moléculaires

Il existe de nombreuses applications basées sur la fluorescence pouvant être utilisées pour caractériser les interactions moléculaires. Cependant, les méthodes disponibles dépendent souvent de techniques de marquage site-spécifique ou de changements de conformation ou de taille induits par la liaison de la molécule cible sondée. Pour surmonter ces limites, nous avons appliqué une approche ratiométrique à double émission qui quantifie les décalages spectraux induits par le ligand avec une sensibilité sub-nanométrique. L'utilisation de colorants dans le proche infrarouge sensibles à l'environnement avec la méthode que nous décrivons permet des mesures d'affinité et une caractérisation thermodynamique sans le besoin explicite d'un marquage site-spécifique ou de changements conformationnels induits par le ligand. Nous démontrons que les mesures de décalage spectral en solution permettent une caractérisation précise des interactions moléculaires pour une variété de biomolécules, notamment les protéines, les anticorps et les acides nucléiques. Ainsi, la méthode décrite ne se limite pas à un sous-ensemble de molécules, puisque même les échantillons les plus complexes des projets de recherche et de découverte de médicaments, tels que les protéines membranaires et les protéines intrinsèquement désordonnées, peuvent être analysés.