Mirk/Dyrk1B médiat la progression du cycle cellulaire de la phase G0/G1 à la phase S et la survie cellulaire impliquant le signalement MAPK/ERK dans les cellules cancéreuses humaines

CONTEXTE : Mirk/Dyrk1B contribue à l'arrêt en G0 par déstabilisation de la cycline D1 et stabilisation de p27kip1 pour maintenir la viabilité des cellules cancéreuses humaines quiescentes, et il pourrait être négativement régulé par la kinase activée par des mitogènes (MAPK)/la kinase régulée par le signal extracellulaire (ERK). Cette étude a été réalisée pour examiner l'effet de Mirk/Dyrk1B sur le cycle cellulaire et la survie des cellules cancéreuses humaines impliquant le signalement MAPK/ERK. MÉTHODES : Les corrélations entre l'expression de Mirk/Dyrk1B et l'ERK1/2 actif détecté par Western blot dans les cellules de cancer de l'ovaire et de cancer du poumon non à petites cellules (NSCLC) ont été analysées par régression simple. Les phosphopetides uniques de Mirk/Dyrk1B avec des sites associés à la protéine Mirk/Dyrk1B ont été isolés et quantifiés par chromato­graphie liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem (LC-MS/MS) analyse protéomique. Les cellules cancéreuses humaines ont été traitées avec des ARN inter­férents (siARN) et/ou U0126, un inhibiteur de MEK pendant une durée indiquée, suivie de l'examen des altérations du cycle cellulaire et de l'apoptose ainsi que des protéines associées examinées par cytométrie en flux et Western blot, respectivement. RÉSULTATS : Notre étude a démontré que les protéines Mirk/Dyrk1B largement exprimées dans les cellules cancéreuses humaines étaient positivement corrélées avec les niveaux d'ERK1/2 activé. De plus, les expressions de protéines Mirk/Dyrk1B consistant avec les niveaux d'autophosphorylation de tyrosine dans les cellules cancéreuses humaines ont été augmentées par U0126 ou un milieu privé de facteur de croissance. À l'inverse, l'extinction de Mirk/Dyrk1B par siARN a entraîné une activation régulée de la voie c-Raf-MEK-ERK1/2 et des changements subséquents dans les protéines du cycle cellulaire (cycline D1, p27kip1), accompagnés d'une augmentation du taux de croissance et de cellules passant de G0/G1 à S du cycle cellulaire, ce qui pourrait être bloqué par U0126 de manière dose-dépendante, indiquant que Mirk/Dyrk1B pourrait séquestrer la voie MAPK/ERK, et vice versa. Tandis que, la combinaison de siARN Mirk et U0126 a induit l'apoptose cellulaire dans les cellules cancéreuses humaines. CONCLUSIONS : Ces données montrent ensemble que Mirk/Dyrk1B médiat le cycle cellulaire et la survie en interagissant avec les signaux MAPK/ERK et que l'inhibition simultanée des deux voies pourrait être une nouvelle cible thérapeutique pour le cancer humain.