Détection de mutations dans les allèles du canal sodique

L'analyse d'une mutation induite par un transgène au locus med de la souris a conduit à l'identification du nouveau gène du canal sodique voltage-dépendant Scn8a (Burgess, D. L., Kohrman, D. C., Galt, J., Plummer, N. W., Jones, J. M., Spear, B., et Meisler, M. H. (1995) Nat. Genet. 10, 461-465). Nous rapportons maintenant l'identification de défauts d'épissage dans deux mutations spontanées de Scn8a. La mutation med originale a été causée par l'insertion d'un élément LINE tronqué dans l'exon 2 de Scn8a. Le transcrit med est épissé de l'exon 1 à un site accepteur cryptique dans l'intron 2. Une délétion de 4 paires de bases dans le site donneur 5′ de l'exon 3 de l'allèle medJ entraîne un épissage de l'exon 1 à l'exon 4. Les deux transcrits mutants ont des cadres de lecture modifiés avec des codons d'arrêt prématurés proches du N-terminus de la protéine. La perte d'expression de Scn8a entraîne une paralysie progressive et une mort précoce. L'intron 2 de Scn8a est flanqué par des sites d'épissage de classe mineure AT-AC. Les motifs d'épissage observés des transcrits mutants med et medJ fournissent la première preuve d'un épissage in vivo préférentiel entre les sites donneurs et accepteurs de la même classe. L'incompatibilité fonctionnelle apparente pourrait être une conséquence de la composition différente des spliceosomes liés aux sites d'épissage majeurs et mineurs.