Reconstituer la formation de chlorophyllide par des membranes d'etéoplastes isolées

La reconstitution de la biosynthèse de chlorophyllide par des membranes d'etéoplastes deorge est décrite. 2. Le processus dépend de l'addition de NADPH et de protochlorophyllide et de l'illumination, qui peut être continue ou intermittente. 3. Le processus reconstitué implique des intermédiaires spectroscopiquement similaires à la réaction native dans les feuilles entières. 4. Les étapes du processus comprennent une formation enzymatique initiale dans l'obscurité d'un complexe photoactif, P638/652 (probablement un complexe ternaire protochlorophyllide-NADPH-enzyme), suivie d'un transfert d'hydrogène très rapide dépendant de la lumière du NADPH vers le protochlorophyllide donnant chlorophyllide donnant chlorophyllide, libérant finalement l'enzyme pour répéter le processus. 5. Un essai continu pour le système régénérant le complexe P638/652 a été conçu sur la base de la surveillance de la formation de chlorophyllide. 6. Le pH optimal de la réaction est de 6,9 et les valeurs de Km pour le protochlorophyllide et le NADPH sont respectivement de 0,46 et 35 microns. 7. La réaction est spécifiquement associée à la fraction membrane d'etéoplastes. 8. Les activités du système testées in vitro sont plus que suffisantes pour expliquer les taux de formation de chlorophylle in vivo.