Clonage et caractérisation du coactivateur prostatique humain ARA54, une protéine novatrice qui s'associe au récepteur aux androgènes

Le récepteur aux androgènes (AR) est un membre de la superfamille des récepteurs stéroïdiens qui peut nécessiter des coactivateurs pour une transactivation adéquate ou maximale. En utilisant un criblage de levure à deux hybridations suivi d'analyses sur cellules mammifères, nous avons identifié une protéine associée à l'AR dépendante des ligands, ARA54, qui se compose de 474 acides aminés avec une masse moléculaire de 54 kDa. Nous avons démontré qu'ARA54 pourrait fonctionner comme un coactivateur préférentiel pour la transactivation médiée par l'AR dans les cellules de cancer de la prostate humaine DU145. Fait intéressant, nos données ont également montré qu'ARA54 pouvait significativement améliorer l'activité transcriptionnelle de l'AR mutant LNCaP (ARt877a) mais pas de l'AR de type sauvage ou d'un autre mutant AR (ARe708k) en présence de 10 nM de 17beta-estradiol ou de 1 microM d'hydroxyflutamide. Ces résultats impliquent qu'ARA54 et les positions de la mutation AR (877 contre 708) pourraient contribuer à la spécificité de la transactivation médiée par l'AR. Nos résultats ont également démontré que le domaine C-terminal d'ARA54 peut servir d'inhibiteur négatif dominant et qu'ARA54 exogène de longueur complète peut inverser cet effet d'écrasement sur l'activité transcriptionnelle de l'AR. La co-expression d'ARA54 avec d'autres coactivateurs AR, tels qu'ARA70 ou SRC-1, a montré une stimulation additive de la transactivation médiée par l'AR, ce qui indique que ces cofacteurs peuvent fonctionner individuellement comme coactivateurs AR pour induire l'expression des gènes cibles de l'AR. Grâce à nos découvertes, nous avons identifié et caractérisé un nouveau coactivateur AR, ARA54, qui pourrait jouer un rôle important dans la voie de signalisation de l'AR dans la prostate humaine.