Analyse d'anticorps monoclonaux de la conservation structurelle de l'antigène nucléaire des cellules proliférantes (PCNA) et détection d'une forme nucléolaire

L'antigène nucléaire des cellules proliférantes, PCNA, a récemment été identifié comme la protéine accessoire de la polymérase delta. Le PCNA est essentiel pour la synthèse de l'ADN cellulaire et est également nécessaire pour la réplication in vitro de l'ADN du virus simien 40 (SV40), où il agit pour coordonner la synthèse de l'ADN des brins direct et retardé à la fourche de réplication. Le cDNA pour le PCNA de rat a été cloné dans une série de vecteurs d'expression bactérienne et la protéine résultante a été utilisée pour immuniser des souris. Onze nouveaux anticorps monoclonaux contre le PCNA ont été isolés et caractérisés. Certains des anticorps reconnaissent des épitopes conservés de l'homme à la levure fission. L'analyse immunocytochimique des lignées cellulaires épithéliales de primates a montré que les anticorps reconnaissaient des formes du PCNA distinctes sur le plan antigénique et que ces formes étaient localisées dans différents compartiments du noyau. Un anticorps a réagi exclusivement avec le PCNA dans le nucléole. Ces résultats suggèrent que la protéine PCNA peut remplir plusieurs rôles distincts dans le noyau cellulaire associés à des changements dans sa structure antigénique.