La digestion de la phospholipase A2 de la cardiolipine liée à l'oxydase du cytochrome c bovin altère à la fois l'activité et la structure quaternaire†

La phospholipase A(2) de Crotalus atrox hydrolyse tous les phospholipides associés à l'oxydase du cytochrome c purifiée et solubilisée par détergent ; moins de 0,05 mol de cardiolipine (CL)(1) reste liée par mol d'enzyme. Coïncidant avec l'hydrolyse de la cardiolipine, il y a une diminution réversible de 45 à 50 % de l'activité de transport des électrons de l'enzyme solubilisée par dodecylmaltoside. L'activité complète est récupérable (90-98 %) par l'addition de cardiolipine exogène, mais pas par la phosphatidylcholine ou la phosphatidyléthanolamine. De manière inattendue, la coupure de la cardiolipine provoque la dissociation des sous-unités VIa et VIb de l'enzyme. Ce sont les deux sous-unités qui forment les principaux contacts protéine-protéine entre les deux unités monomériques au sein du complexe dimérique. Bien que l'hydrolyse de la CL par la phospholipase A(2) et la perte de ces sous-unités soient liées, le processus inverse ne se produit pas, c'est-à-dire que le retrait des sous-unités VIa et VIb ne provoque pas la dissociation des deux cardiolipines fonctionnellement importantes et fortement liées. Ni l'ajout de cardiolipine exogène ne résulte en une réassociations des deux sous-unités avec le reste du complexe. Nous concluons que la cardiolipine est non seulement essentielle pour l'activité complète de transport des électrons, mais elle a également un rôle structurel important dans la stabilisation de l'association des sous-unités VIa et VIb avec le reste de l'enzyme cardiaque bovine.