Caractéristiques de liaison de la toxine tétanique marquée au 125i aux cultures de tissus primaires dérivées du SNC embryonnaire de souris

Résumé— L'interaction de la toxine tétanique marquée au 125 I avec les cellules des cultures tissulaires dérivées du SNC embryonnaire a été étudiée. La liaison optimale de la toxine se produit environ 2 à 3 semaines après le transfert des cellules aux conditions de culture. La quantité de marqueur liée par culture a doublé à ce moment par rapport au quatrième jour après inoculation. La quantité de toxine liée dépend de la concentration appliquée. Elle atteint son maximum 8 h après application puis diminue lentement. De faibles quantités de radioactivité étaient encore détectables 97 h après le lavage de la toxine non liée. Jusqu'à 80 % du marqueur peut être remplacé par une application simultanée de toxine « froide ». La fixation de la toxine est plus élevée à 4 °C qu'à 37 °C. La pré-incubation des cultures avec de la neuraminidase empêche environ 75 % de la liaison. La présence de cytochalasine B entraîne une petite mais reproductible diminution de la liaison, tandis que la colchicine n'a eu aucun effet mesurable. Le matériel radioactif (125 I) a été identifié par une technique à double isotope dans l'électrophorèse sur gel disc avant et après rupture réductrice de ses liaisons disulfure. Dans chaque test, il était indistinguable de la toxine marquée au 131 I ajoutée comme référence. Nos résultats parallèles en grande partie ceux obtenus avec des synaptosomes et d'autres systèmes. Ils suggèrent que les gangliosides pourraient être les molécules accepteurs, et que le système de culture sera approprié pour étudier les actions de cette toxine in vitro.