Un système CRISPR/Cas sans clonage facilite l'insertion fonctionnelle de cassette chez les souris

Bien que le système CRISPR/Cas ait permis la génération en une étape de souris knockout, les faibles taux de succès de l'insertion de cassette limitent son champ d'application. Ici, nous montrons que la livraison nucléaire directe du complexe protéique Cas9 sans clonage avec des ARN double synthétisés chimiquement permet une digestion cible très efficace, menant à la génération de souris knock-in portant une cassette fonctionnelle avec jusqu'à 50 % d'efficacité, contre seulement 10 % par une méthode couramment utilisée composée de l'ARNm Cas9 et d'un ARN guide unique. Notre système CRISPR/Cas sans clonage facilite la génération rapide en une étape de souris knock-in de cassette, accélérant la recherche génomique fonctionnelle en fournissant divers outils génétiques in vivo.