Purification partielle du système de transport du D-glucose dans les membranes plasmatiques des adipocytes de rat.

Des membranes plasmatiques d'adipocytes de rat partiellement purifiées ont été soumises à des extractions protéiques sélectives utilisant de l'hydroxyde de sodium, de l'iodure de sodium et de l'anhydride diméthylmaléique dans le but d'identifier les composants de la membrane associés au transport du glucose. Jusqu'à 80 % des protéines membranaires ont été extraites au cours de ces procédures, les protéines restantes consistant presque entièrement en deux fractions glycoprotéiques, de 78 000 et 94 000 daltons, comme déterminé par électrophorèse sur gel de polyacrylamide à sulfate de dodécyle. La disruption sonique de ces résidus membranaires extraits a entraîné la formation de structures vésiculaires, comme révélé par microscopie électronique. Ces vésicules ont démontré une forte affinité de liaison de 3Hcytochalasine B dans les trois préparations. Les vésicules des membranes extraites avec l'anhydride diméthylmaléique ont également montré une absorption stéréospécifique marquée du o-glucose par rapport au L-glucose, mesurée par une méthode de filtration rapide. Cette absorption a été considérablement inhibée par la cytochalasine B et cette inhibition a parallèlement fortement corrélé avec la liaison à haute affinité de 3Hcytochalasine B à ces vésicules. De plus, l'absorption de o-3Hglucose a été inhibée par la phorétine, la phlorizine et le dipyridamole, tous des inhibiteurs puissants du transport de n-glucose dans l'adipocyte intact. Des inhibiteurs compétitifs du transport du glucose tels que le 3-O-méthylglucose et non étiqueté