Impacts sur les attributs de qualité des produits des anticorps monoclonaux produits dans des cultures de bioréacteurs à cellules CHO lors d'événements intentionnels de contamination par des mycoplasmes

Résumé Un événement de contamination par des mycoplasmes dans une installation de bioproduction peut entraîner des nettoyages coûteux et des pénuries potentielles de médicaments. Les mycoplasmes peuvent survivre dans des cultures de cellules mammifères avec seulement de légers changements dans la culture et pénétrer les filtres standard de 0,2 µm utilisés dans la clarification du liquide de culture cellulaire récolté. Auparavant, nous avions rapporté une étude concernant la capacité de Mycoplasma arginini à persister dans un système de bioréacteur à perfusion à usage unique contenant une lignée cellulaire DG44 d'ovaire de hamster chinois (CHO) exprimant un anticorps monoclonal immunoglobuline G 1 (IgG1) modèle. Nos travaux précédents ont montré que M. arginini affecte le profil de croissance des cellules CHO, la viabilité, la consommation de nutriments, l'utilisation de l'oxygène et la production de déchets à différents moments après l'introduction de M. arginini dans la culture. Une évaluation minutieuse de certains paramètres de processus identifiés au fil du temps peut être utilisée pour indiquer une contamination par des mycoplasmes dans les cultures de cellules CHO dans un bioréacteur avant que la détection ne soit effectuée par une méthode traditionnelle. Dans ce rapport, nous avons étudié les changements dans la qualité du produit IgG1 produit par les cellules CHO considérées comme induites par les événements de contamination par M. arginini. Nous avons observé des changements dans les attributs critiques de qualité corrélés à la durée de la contamination, y compris l'augmentation des variants de charge acide et des espèces de mannose élevé, qui ont été modélisés à l'aide d'une analyse en composantes principales pour explorer les relations entre la contamination par M. arginini, la croissance des cellules CHO et les métabolites, et les attributs de qualité du produit IgG1. Enfin, des modèles de moindres carrés partiels utilisant des données spectrales NIR ont été utilisés pour établir des prédictions de niveaux élevés (≥10 4 unités formant colonie CFU/ml) de contamination par M. arginini, mais la prédiction de niveaux inférieurs à 10 4 CFU/ml n'était pas fiable. La contamination des cellules CHO avec M. arginini a entraîné une réduction significative de la qualité du produit anticorps, soulignant l'importance des tests microbiologiques rapides et des tests de mycoplasmes lors de processus biopharmaceutiques en amont particulièrement longs pour garantir la sécurité et la qualité du produit.